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2023
1-11熒光抗體技術(shù)在臨床檢驗(yàn)上已用作細(xì)菌、病毒和寄生蟲(chóng)的檢驗(yàn)及自身免疫病的診斷等。在細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)中主要用于菌種的鑒定。標(biāo)本材料可以是培養(yǎng)物、感染組織、病人分泌排泄物等。本法較其他鑒定細(xì)菌的血清學(xué)方法速度快、操作簡(jiǎn)單、敏感性高，但在細(xì)菌實(shí)驗(yàn)診斷中，一般只能作為一種補(bǔ)充手段使用，而不能代替常規(guī)診斷。熒光抗體染色法對(duì)腦膜炎奈氏菌、痢疾志賀菌、霍亂弧菌、布氏桿菌和炭疽桿菌等的實(shí)驗(yàn)診斷有較好效果。熒光間接染色法測(cè)定血清中的抗體，可用于流行病學(xué)調(diào)查和臨床回顧診斷。免疫熒光用于梅毒螺旋體抗體的檢測(cè)...
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1-6隨著抗疫政策的逐步放開(kāi)，奧密克戎(Omicron)變異株以勢(shì)不可擋的趨勢(shì)迅速傳播蔓延，用于初篩診斷的抗原檢測(cè)卡的市場(chǎng)需求量也隨之陡升，成為“搶手貨“。核酸與抗原有什么區(qū)別？核酸檢測(cè)是新冠感染確診的“金標(biāo)準(zhǔn)“，但檢測(cè)耗時(shí)長(zhǎng)，需要專(zhuān)業(yè)的人員和實(shí)驗(yàn)室條件。而抗原檢測(cè)則操作簡(jiǎn)便、不需要儀器、居民自己在家里就能夠檢測(cè)，15分鐘就能出結(jié)果?？乖瓩z測(cè)并不是新技術(shù)，而是稍顯“古老“的免疫層析技術(shù)。目前市面上見(jiàn)的最多是膠體金和膠乳層析法，采用最為經(jīng)典”雙抗體夾心法“?？乖噭┥a(chǎn)的最核心的原料...
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12-29背景資料視黃醇結(jié)合蛋白(Retinol-BindingProtein,RBP)是血液中維生素的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，由肝臟合成、廣泛分布于血液、腦脊液、尿液及其他體液中。RBP有5個(gè)亞型，分別為分泌型RBP、細(xì)胞內(nèi)RBP、視黃酸的核受體、視覺(jué)組織特異性的細(xì)胞外RBP和視覺(jué)組織特異性的細(xì)胞內(nèi)RBP。血漿中主要是肝細(xì)胞表達(dá)分泌的RBP4，是血液中weishengsuA的特異轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，由181個(gè)氨基酸組成，分子量為21kD。血漿中RBP4分子量小，可自由濾過(guò)腎小球，但原尿中99%的RBP被近曲...
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12-28背景資料C反應(yīng)蛋白(C-reactiveprotein,CRP)是相對(duì)分子質(zhì)量(115-140)×103的血清β球蛋白，是由5個(gè)相同的亞單位以非共價(jià)鍵結(jié)合而成的環(huán)狀五球體，這一特征性結(jié)構(gòu)使其歸類(lèi)于五聚素（一組具有免疫防御特性的鈣結(jié)合蛋白）家族。低等動(dòng)物同樣存在CRP，如在鱟、河蚌等中也發(fā)現(xiàn)過(guò)，但并不一定起急性期反應(yīng)蛋白的作用。CRP特征反應(yīng)是能在鈣離子存在的條件下特異性結(jié)合磷酸膽堿基團(tuán)。CRP在人的血清、CSF、胸腹水等多種體液中均可被檢測(cè)。臨床意義CRP作為炎癥標(biāo)志物，對(duì)于...
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12-28背景資料半胱氨酸蛋白酶抑制劑C(CystatinC,Cys-C)，又名胱抑素C，廣泛存在于各種組織的有核細(xì)胞和體液中，是一種低分子量、堿性非糖化蛋白質(zhì)，分子量為13.3KD，由122個(gè)氨基酸殘基組成，可由機(jī)體所有有核細(xì)胞產(chǎn)生，產(chǎn)生率恒定。循環(huán)中的Cys-C僅經(jīng)腎小球?yàn)V過(guò)而被清除，是一種反映腎小球?yàn)V過(guò)率變化的內(nèi)源性標(biāo)志物，并在近曲小管重吸收，但重吸收后被代謝分解，不返回血液，因此，其血中濃度由腎小球?yàn)V過(guò)決定，而不依賴(lài)任何外來(lái)因素，如性別、年齡、飲食的影響，是一種反映腎小球?yàn)V過(guò)率...
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12-23流式細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)是一種對(duì)液流中排成單列的細(xì)胞或其它生物微粒（如微球，細(xì)菌，小型模式生物等）逐個(gè)進(jìn)行快速定性、定量分析和分選的技術(shù)。該技術(shù)廣泛的運(yùn)用于從基礎(chǔ)研究到臨床實(shí)踐的各個(gè)方面，涵蓋了細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、血液學(xué)、腫瘤學(xué)、藥理學(xué)、遺傳學(xué)及臨床檢驗(yàn)等領(lǐng)域。可檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞、組織樣本、分離細(xì)胞等，其檢測(cè)結(jié)果以直方圖、二維圖或假三維圖表示，用于檢測(cè)免疫表型分析（白血病、淋巴瘤、干細(xì)胞、疾病診斷、藥物評(píng)價(jià)）、DNA含量及細(xì)胞周期分析、細(xì)胞特異性標(biāo)記物、細(xì)胞凋亡研究、基因轉(zhuǎn)染鑒定等方面。...
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12-16目前有多種蛋白標(biāo)記技術(shù)來(lái)幫助我們研究感興趣的蛋白質(zhì)的豐度、位置、相互作用、翻譯后修飾、功能，乃至監(jiān)測(cè)活細(xì)胞中的蛋白質(zhì)運(yùn)輸?shù)葐?wèn)題。目前有多種類(lèi)型的標(biāo)記物和標(biāo)記方式可供選擇，但是針對(duì)特定的應(yīng)用應(yīng)當(dāng)選擇適合的標(biāo)記策略。代謝標(biāo)記策略代謝標(biāo)記策略是一種體內(nèi)標(biāo)記方法，在這種方法中，細(xì)胞被“喂養(yǎng)”了化學(xué)標(biāo)記的營(yíng)養(yǎng)物，然后這些標(biāo)記物被摻入新合成的蛋白質(zhì)、核酸或代謝物中。然后，我們可以收集細(xì)胞并分離這些分子以獲得細(xì)胞生物過(guò)程的全局視圖。蛋白同位素標(biāo)記原理：蛋白同位素標(biāo)記是一種經(jīng)典的蛋白示蹤和蛋...
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12-9(一)獲得目的基因1、通過(guò)PCR方法：以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板，按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn))，PCR循環(huán)獲得所需基因片段。2、通過(guò)RT-PCR方法：用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA，以mRNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈，以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體1、熒光素標(biāo)記的生物素載體酶切：將表達(dá)質(zhì)粒用限制性?xún)?nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切，酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后，用膠回收Kit或凍融法回收載...
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